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Tunel检测
作者:管理 发布时间:2022-08-19 12:06:16
1)TUNEL(白光)检测
晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3’-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下,将带有生物素(Biotin)分子的dUTP,标记到DNA的3’-末端,随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素Streptavidin(Streptavidin-HRP)结合,最后通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
结果呈现:
2)TUNEL(荧光)检测
晚期凋亡细胞中染色体DNA双链或单链断裂产生粘性3’-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化下,将带有荧光素分子的dUTP标记到DNA的3’-末端,然后通过荧光显微镜观察、或进而用带有HRP的一抗染色后DAB显色,可以进行凋亡细胞的检测,该实验称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)。