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切片

   作者:管理   发布时间:2022-08-19 11:52:18

1)石蜡切片

石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。

实验流程:

 样本接收:组织蜡块。

 实验步骤:将修整好的蜡块置于石蜡切片机切片,厚3-4 μm。切片漂浮于摊片机40 ℃ 温水上将组织展平,载玻片将组织捞起,60 ℃烘箱内烤片。水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。

 实验结果:切好的玻片。

2)冰冻切片

冰冻切片(frozen section)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,且不经过酒精、二甲苯等有机溶剂及高温环境。可较好的保存脂类,酶类等易于溶解有机溶剂的物质。对切片厚度的要求也可以更好的满足。

主要应用:

 切片后常规的HEIHCIF染色等。

 某些酶的显示如ATP酶,β-半乳糖苷酶等。

 组织中的脂肪和脂类物质,这常见于某些病例如脂肪瘤、脂肪肝等。切片后,经过油红O染色辅助判断。

 神经病理学技术中,要求一定厚度的脑组织切片等。

 对某些物质所进行的免疫荧光的研究,比如新鲜组织自发荧光,切片后观察。

实验流程:

 样本接收:干冰保存运输的新鲜组织或者常温固定液保存的组织。

 实验步骤:新鲜组织取材并OCT包埋/固定组织经过15%-30%梯度蔗糖溶液脱水后取材并OCT包埋,然后按指定要求切片。

 实验结果:低温存放的完成的切片。


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