1）细胞增殖

细胞增殖实验是判定细胞活力的重要指标，有多种显示方法，除实验的细胞计数法之外，还可以进行细胞分裂指数的测定。细胞分裂是细胞增殖的方式，能比较确切地反映细胞增殖度。

① CCK-8法：CCK-8试剂盒是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞 毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT 被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。

② EdU染色：EdU（5-ethynyl-2’-deoxyuridine），中文名为5-乙炔基-2’-脱氧尿苷，是一种新型胸苷（胸腺嘧啶脱氧核苷，thymidine）类似物，EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。另一方面，EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针（如Azide Alexa Fluor 488、Azide Alexa Fluor 555、Azide Alexa Fluor 594、Azide Alexa Fluor 647等）通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记，从而可以使用适当的荧光检测设备检测到增殖的细胞。

③ 克隆形成：克隆形成实验是测定单个细胞增殖能力的有效方法。所谓克隆是指单个细胞在体外持续增殖6代以上其后所形成的细胞群，形成肉眼可见的克隆。通过计数得出克隆形成率，可对受检细胞的增殖潜力作定量分析。

④ 流式周期检测：细胞周期（Cell Cycle）是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期）。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期，停止细胞分裂，执行一定生物学功能（G0期）。流式细胞仪PI染色法检测细胞周期的原理：由于细胞周期各时相的DNA 含量不同，通常正常细胞的G1/G0期具有二倍体细胞的DNA含量（2N），而G2/M期具有四倍体细胞的DNA含量（4N），而S期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。PI可以与DNA结合，其荧光强度直接反映了细胞内DNA含量。因此，通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0期、S期和G2/M期，获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。

2）凋亡检测

① 流式凋亡检测：细胞膜组分磷酯酰丝氨酸（PS）在正常情况下位于细胞膜内侧，当细胞坏死或者凋亡时，PS迁移至细胞膜外侧。磷脂结合蛋白V（Annexin V）是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白，它与PS具有高度的结合力。荧光素FITC标记的Annexin V可以作为探针检测暴露在细胞膜外侧的磷酯酰丝氨酸，指示坏死或凋亡的细胞。FITC-Annexin V结合到细胞后，在蓝色光的激发下，发出绿色荧光。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）是一种核酸染料，它不能透过完整细胞膜，但对凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞膜能够穿透，并使细胞核红染，而细胞膜保持完好的早期凋亡细胞则不会有红色荧光产生。联合应用Annexin V-FITC和PI对培养体系中的细胞进行染色，Annexin V（-）/PI（-）代表健康活细胞，Annexin V（+）/PI（-）代表早期凋亡细胞，Annexin V（+）/PI（+）代表晚期凋亡细胞和坏死细胞。

② Hechst染色：细胞发生凋亡时，染色质会固缩。所以Hoechst 33258染色后，在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。

③ Tunle检测：细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200 bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase，TdT）的催化下加上绿色荧光探针荧光素（FITC）标记的dUTP（luorescein-dUTP），从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。

3）迁移和侵袭

① Transwell：细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

② 划痕实验：划痕实验又称为创伤愈合实验，是一种简单、廉价的方法，也是最早发展起来的研究定向细胞在体外迁移的方法之一。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个“伤口”，在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像以关闭伤口，以及比较图像以确定细胞迁移速率。

4）血管形成：

目前通常所说的血管形成实验是指管腔形成实验。管腔形成反映毛细血管的早期过程，是体外检查内皮细胞功能最完整的指标。血管形成过程中内皮细胞会形成细胞条索，然后形成管腔，体外在特定条件下如基质胶、胶原等培养时也能形成管腔。药物通过抑制管腔形成或使形成的管腔断裂来达到抑制血管形成的作用。借助计算机软件计算小管数及小管之间的连接数及小管的长度和面积，可定量分析药物对管腔形成的影响。