转录通常发生在生物体内，如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件，在体外无细胞系统中，用DNA作为模板，模仿体内转录过程后生成RNA，这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途，该方法被称为体外转录法。

转录模板必须满足：1、在基因组全长克隆过程中，在正向引物5’端添加T7启动子序列；2、以T7启动子作为体外转录启动子，在启动子后面靶位序列连续带有3个G，转录效率最高；3、在正向引物’端添加一个帽子G，有利于提高体外转录RNA分子的侵染活性。