载体构建：将特定序列（如基因CDS区，miRNA，lncRNA等）进行克隆获得，并将其构入特定的表达载体（pcDNA3.0等），在转染剂的辅助下，将载体转染进入细胞，实现在宿主细胞内目的片段大量表达而实现的过表达的过程。

定点突变：根据设计的要求合成覆盖突变位点的双向引物，通过PCR向目的DNA片段中引入所需的变化，如碱基的插入、删除、替换等，改变对应的氨基酸序列和蛋白质结构和功能。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，是基因研究工作中一种非常有用的手段。 实验原理：PCR介导的定点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因组，也可以是质粒）中引入所需变化（通常是表征有利方向的变化），包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征，是基因研究工作中一种非常有用的手段。